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2023
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植提行業有哪些常見的植物提取物檢測方法?HPLC方法詳解
植提行業有哪些常見的植物提取物檢測方法呢? 要為各位帶來的HPLC檢測方法,對于不了解此種提取物檢測的可能會問什么是HPLC?HPLC工藝流程是怎么樣的?
什么是HPLC?
HPLC全稱是High Performance Liquid Chromatography( 液相色譜法),又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。
液相色譜法(HPLC)是20世紀60年代后期發展起來的一種分析方法。近年來,在保健食品功效成分、營養強化劑、維生素類、蛋白質的分離測定等應用廣泛。 上約有80%的有機化合物可以用HPLC來分析測定。
液相色譜法特點
液相色譜法(HPLC)具有高壓、 、高速、高靈敏度、高選擇性等特點,廣泛應用于醫藥、環保、石化、食品、化工等行業,是現在分離分析的重要方法。
液相色譜分析的流程
由泵將儲液瓶中的溶劑吸入色譜系統,然后輸出,經流量與壓力測量之后,導入進樣器。被測物由進樣器注入,并隨流動相通過色譜柱,在柱上進行分離后進入檢測器,檢測信號由數據處理設備采集與處理,并記錄色譜圖。廢液流入廢液瓶。遇到復雜的混合物分離(極性范圍比較寬)還可用梯度控制器作梯度洗脫。這和氣相色譜的程序升溫類似,不同的是氣相色譜改變溫度,而HPLC改變的是流動相極性,使樣品各組分在.佳條件下得以分離。
液相色譜的分離過程
同其他色譜過程一樣,HPLC也是溶質在固定相和流動相之間進行的一種連續多次交換過程。它借溶質在兩相間分配系數、親和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差別使不同溶質得以分離。
開始樣品加在柱頭上,假設樣品中含有3個組分,A、B和C,隨流動相一起進入色譜柱,開始在固定相和流動相之間進行分配。分配系數小的組分A不易被固定相阻留,較早地流出色譜柱。分配系數大的組分C 在固定相上滯留時間長,較晚流出色譜柱。組分B的分配系數介于A,C之間,第二個流出色譜柱。若一個含有多個組分的混合物進入系統,則混合物中各組分按其在兩相間分配系數的不同先后流出色譜柱,達到分離之目的。
不同組分在色譜過程中的分離情況,首先取決于各組分在兩相間的分配系數、吸附能力、親和力等是否有差異,這是熱力學平衡問題,也是分離的首要條件。其次,當不同組分在色譜柱中運動時,譜帶隨柱長展寬,分離情況與兩相之間的擴散系數、固定相粒度的大小、柱的填充情況以及流動相的流速等有關。所以分離.終效果則是熱力學與動力學兩方面的綜合效益。
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